PROTEOSTAT®加速蛋白稳定性筛选

PROTEOSTAT^® Thermal shift stability assay kit

加速蛋白稳定性筛选

●　简单、灵敏、均相的荧光检测，无需分离或稀释样品

●　可用于加速优化蛋白稳定性条件

●　无需了解蛋白功能或配体结合位点，也可进行配体结合检测

●　可在较广的温度、pH值和离子强度范围内使用，与常用的缓冲液和辅料兼容

●　为采用多种仪器进行交叉验证提供一种方便、互补的正交方法

PROTEOSTAT^® Thermal shift 稳定性检测试剂盒内含有一种检测蛋白聚集的荧光染料，因此可用于监测系统热应力条件下的蛋白稳定性。通过 Thermal shift 分析，可轻松确定大部分蛋白的聚集温度。聚集温度是蛋白稳定性的指标，可用于优化使蛋白聚集最小化的条件，以及鉴定与目标蛋白结合并赋予结构稳定性的配体。配合使用相关的 PROTEOSTAT^® 蛋白复性和聚集敏感试剂盒（产品编号：ENZ-51040）可确定合适的蛋白复性条件。增加聚集温度的优化条件可使蛋白的稳定性有所提升。

图1. 利用PROTEOSTAT^® Thermal shift 稳定性检测试剂盒分析山羊抗小鼠 IgG（pH=7.4，11.2 mg/mL）的典型结果。

图1. 使用 RT-PCR 仪器，以 3°C/min 的速率将温度从30°C升至99°C，同时连续读取荧光值。蓝线表示原始荧光强度数据，红线表示对应的一阶导

图1. 数曲线，代表荧光强度曲线的斜率。通过一阶导数图，可得出蛋白的聚集温度（T_agg：斜率最大点）。

PROTEOSTAT^® 染料的 T_agg 值不同于 SYPRO^® Orange 染料的 T_m 值

图2. PROTEOSTAT^® 染料所得得聚集温度不同于使用 SYPRO^® Orange 染料获得的熔解温度。

图2. SYPRO^® Orange 染料是一种环境敏感染料，能够与未折叠蛋白的疏水区结合，用于测量 T_m。T_m 是 Thermal shift 曲线的温度中点，在温度

图2. 中点 T_m 时，样品中的目标蛋白一半呈现出解折叠状态，而另一半保持折叠状态。解折叠不依赖于相邻蛋白。PROTEOSTAT 是一种分子转子染

图2. 料，可与蛋白质聚集体的表面结合。T_agg 是热聚集曲线的中点。蛋白解折叠后开始聚集，聚集取决于相邻蛋白。蛋白浓度越高，聚集的趋势越

图2. 大。

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