
简要描述:DISPASE® 是切断肽链的中性及非极性氨基酸N末端的金属蛋白酶,能够把上皮细胞从组织上剥离成片状,可用于原代培养的细胞分离与分散。与yi蛋白酶和胶原酶等蛋白酶不同,DISPASE®造成的细胞损伤更少,可温和地分散细胞,因此也被应用于ES和iPS细胞等再生医学领域。
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| 品牌 | 其他品牌 | 供货周期 | 一个月 |
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分散酶DISPASE®
DISPASE® 是切断肽链的中性及非极性氨基酸N末端的金属蛋白酶,能够把上皮细胞从组织上剥离成片状,可用于原代培养的细胞分离与分散。与yi蛋白酶和胶原酶等蛋白酶不同,DISPASE®造成的细胞损伤更少,可温和地分散细胞,因此也被应用于ES和iPS细胞等再生医学领域。
本产品不含动物源成分。


◆产品信息
| DISPASE® I | DISPASE® II | |
| 特性 | 结晶酶,无菌产品 | 粉末酶,非无菌产品 |
| 包装 | 6 小瓶 | 1 g |
| 酶活性 | 10,000-13,000 PU/小瓶 | 300,000-360,000 PU/g |
| 添加剂等 | 含有醋酸钙 | 含有糊精和醋酸钙 |
| 储存方法 及有效期 | 生产后在 2~10℃下可储存 2年(未开封); 开封溶解后请冻存在-20℃以下,并在 6个月内使用。 | |
◆优点、特色
1. 来源于Paenibacillus sp. (旧名:Bacillus polymyxa)的中性金属蛋白酶,活性中心含有Zn2+, 并使用Ca2+ 稳定其活性。
2. 酶活性几乎不受血清影响,无论有无血清均可使用。通过添加EDTA或者稀释反应液即可停止酶促反应。
3. 可以很好地分解构成基底膜的IV型胶原、纤连蛋白,让上皮细胞从组织上剥离成片状。
4. 与yi蛋白酶、胶原酶等蛋白酶的作用不同,造成的细胞损伤更少,可温和地分散细胞。
5. 作用条件范围广泛,可以在不同的酶浓度、处理时间、温度以及pH条件下起作用。
6. 在一般细胞培养温度(37°C)下非常稳定,对于某些细胞类型,添加本产品可实现悬浮培养。
7. 无动物源成分,不含支原体。
◆作用条件
| 酶浓度 | 100~2,000 PU/mL |
| 溶解buffer | 含有Ca2+的缓冲液或者培养基(可含有血清) |
| 反应时间 | 30 min~几天 |
| 反应温度 | 室温~37℃ |
| 反应pH | 6.5~9.0 |
| 抑制剂 | EDTA, Fe3+, Fe2+, Ni2+, Cu2+, Al3+, Zn2+ |
※ 1 PU的定义是使用酪蛋白分解法1 min内释放1 μg酪an酸的酶活性。

◆细胞分散实验

◆应用示例
应用示例 | 使用浓度 | 反应时间 |
从细胞培养设备上剥离人成纤维细胞薄片 | 10 PU/mL | 1 h |
从细胞培养设备上剥离人表皮细胞 | 1000 U/mL | 1 h |
分离人皮肤表皮层和真皮层 | 2000 U/mL | 1 h |
从人粘膜组织中分离上皮和真皮组织 | 1000 PU/mL | 16 h |
分离人皮肤表皮层和真皮层 | 1000 U/mL | 12 h |
分离人皮肤表皮伤口和真皮层 | 250 U/mL | 24 h |
分离人间充质干细胞(hMSC) | 1000 U/mL | 20 min |
人牙髓组织细胞的分散 | 60 U/mL | 20 min |
从人牙髓组织中分离牙髓细胞 | 2% | 1 h |
从人口腔边缘粘膜上皮层分离上皮细胞 | 1000 PU/mL | 16 h |
从小鼠、大鼠和人眼球中分离虹膜色素上皮细胞 | 1000 U/mL | 40 min |
从小鼠背部皮肤分离表皮和真皮 | 500 U/mL | 18 h |
分离小鼠皮肤表皮和真皮组织 | 500 U/mL | 16 h |
从小鼠皮肤切片剥离表皮细胞 | 5 mg/mL | 30 min |
从小鼠皮肤切片剥离表皮细胞 | 5 mg/mL | 18 h |
从大鼠空肠粘膜上剥离小肠上皮细胞 | 2 mg/L | 30min |
从兔角膜中分离角膜实质细胞 | 1000 U/mL | 1 h |
分散鱼类生殖细胞 | 1.65 mg/mL | 2 h |
※ 分散酶DISPASE® 的效果因细胞种类和培养状况而异。
推荐浓度为100~2,000 PU/mL,最佳浓度需摸索。
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| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 386-02271 | DISPASE® Ⅰ 分散酶® | 10,000 PU x 6 | - | - |
| 383-02281 | DISPASE® Ⅱ 分散酶®Ⅱ | 1g | - | - |
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 038-24561 | Collagenase Type A, Animal-derived-free 胶原酶 A型,无动物源性成分 | 100 mg | 细胞分散用 | - |
| 034-24563 | Collagenase Type A, Animal-derived-free 胶原酶 A型,无动物源性成分 | 500 mg | 细胞分散用 | - |
| 036-23141 | Collagenase, recombinant, Animal-derived-free 胶原酶,重组,无动物源性成分 | 240000 units | 细胞分散用 | - |
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