POLARIC™ 活细胞荧光变色溶剂

POLARIC™ 活细胞荧光变色溶剂

新型荧光染料

◆背景

　　POLARIC是活细胞独特的变色荧光溶剂。POLARIC可根据细胞器微环境的疏水性变化，发射光谱改变显著。

◆特点和优点

●　细胞毒性极低。
●　在460-520 nm的激发波长可达到最小细胞损伤。
●　抗褪色荧光。
●　根据细胞器的微环境的疏水性/亲水性，发射光谱改变显著。

◆实验流程

１．用3 μL乙醇溶解红色染料沉淀，并将染料溶液转移到10 mL培养基（染色溶液）中。 染色溶液可在4℃保存2周，避光保存。

２．将细胞培养在玻璃底皿（非液晶玻璃）上。
３．去除培养皿中的培养基，用PBS冲洗，加入等体积的预热染色溶液。

４．细胞在5％CO₂，在37℃条件下孵育2小时10分钟。 染色条件应针对细胞进行优化。

５．染色后用培养基洗涤细胞培养物3次。

６．使用荧光显微镜在Ex 460 nm 520 nm和Em 520 nm 700 nm下观察染色的细胞。

◆应用

1、使用案例<HEK293>

　　根据不同细胞器“着色变化"不同。

2、使用案例<Hela细胞>

3、使用案例<rVAC（大鼠内脏脂肪细胞）>

　　线粒体：橙色
　　细胞膜：绿色
　　内质网：黄色

4、使用案例<大鼠心肌细胞>

　　可使用不同的颜色染色心肌细胞（橙色）和非心肌细胞。染色后，心肌细胞继续跳动。

染色结果比较

5、使用案例<大鼠骨髓单核细胞>

　　在大鼠骨髓单核细胞-破骨细胞分化培养过程中，染色观察大鼠骨髓单核细胞向破骨细胞分化的过程。