详细介绍下ips干细胞培养基的具体成分
更新时间：2026-03-10
浏览次数：31
iPS干细胞培养基是维持细胞未分化、高增殖、多能性的核心体系，成分可分为基础营养、血清/替代物、生长因子、抗氧化/代谢补充、抗污染、小分子调节剂六大类，不同配方（传统饲养层、无血清、化学成分明确）差异显著。
一、基础培养基（核心营养骨架）
提供细胞生存必需的碳源、氮源、维生素、无机盐与缓冲体系，主流为：
DMEM/F12：很常用，含高葡萄糖、平衡盐、多种维生素，pH稳定（7.2–7.4），渗透压约340mOsm。
KnockOutDMEM：专为干细胞优化，低渗透压、低钙，适配血清替代物（KSR）。
基础成分：葡萄糖（4.5g/L）、NaCl、KCl、NaHCO₃、CaCl₂、MgSO₄、酚红（pH指示剂）、水溶性维生素（B族、叶酸、烟酰胺）。
二、血清/血清替代物（生长与黏附支持）
1.传统含血清配方（饲养层培养）
胎牛血清（FBS）：10%–20%，含生长因子、黏附蛋白、激素；但批次差异大、有动物源污染风险。
替代方案：KnockOutSerumReplacement（KSR），20%，化学成分明确、无动物源，是iPS主流选择。
2.无血清/化学成分明确配方（如Essential8/E8）
不含血清，用重组蛋白+小分子替代：胰岛素（19.4mg/L）、转铁蛋白（10.7mg/L）、亚硒酸钠（14μg/L），提供铁代谢、抗氧化与能量支持。
三、关键生长因子（维持多能性的核心）
bFGF（FGF2）：必需核心因子，终浓度4–100ng/mL（常用20ng/mL），激活FGFR通路，抑制分化、促增殖。
TGFβ1/Nodal：E8等无血清配方添加（2μg/LTGFβ1），协同bFGF维持未分化状态。
LIF（白血病抑制因子）：小鼠iPS专用（12.5ng/mL），人iPS通常不依赖。
四、代谢与抗氧化补充剂
L-谷氨酰胺（GlutaMAX）：2mM，细胞能量与蛋白合成必需，易降解，建议用稳定型替代物。
非必需氨基酸（NEAA）：1×，补充丙氨酸、天冬氨酸等，减轻细胞合成负担。
β-巯基乙醇（2-ME）：100μM，抗氧化，保护细胞免受氧化应激，促存活。
抗坏血酸-2-磷酸镁：64mg/L，E8配方添加，抗氧化、促胶原合成。
五、抗污染与辅助成分
双抗（Pen/Strep）：青霉素100U/mL+链霉素100μg/mL，抑制细菌污染（科研常用，临床级多不加）。
两性霉素B：可选，抗真菌。
BSA（牛血清白蛋白）：0.1%–1%，保护生长因子、减少细胞贴壁损伤。
六、小分子调节剂（提升存活与克隆效率）
ROCK抑制剂（Y-27632）：传代/单细胞接种时用（10μM），抑制凋亡、大幅提高克隆形成率。
其他：如CHIR99021（GSK3抑制剂）、PD0325901（MEK抑制剂），用于特定多能性维持体系。
