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干细胞冻存液有哪些关键成分?

更新时间:2025-07-31

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  干细胞冻存液是用于在低温环境中保存干细胞活性与功能的重要溶液,其关键成分对维持干细胞的完整性和活性至关重要。以下是干细胞冻存液中常见的关键成分及其作用:
 
  1. 二甲基亚砜(DMSO)
  DMSO 是一种常用的渗透性冷冻保护剂。它能够穿透细胞膜,通过与水分子形成氢键,干扰冰晶的形成,从而减少冰晶对细胞膜的损伤。此外,DMSO 还可以降低细胞内外的渗透压差,防止细胞在冷冻过程中因水分外渗而过度脱水皱缩。在临床和实验室中,DMSO 的浓度通常控制在 5% - 10% 之间,以平衡其保护效果和细胞毒性。
 
  2. 胎牛血清(FBS)
  胎牛血清富含蛋白质、生长因子和营养成分,能够为干细胞提供丰富的营养支持。在冻存过程中,FBS 可以保护细胞膜,减少细胞因冷冻而受到的机械损伤,同时也有助于维持细胞的代谢平衡。通常,FBS 在冻存液中的浓度为 10% - 20%。
 
  3. 葡萄糖
  葡萄糖是细胞的主要能量来源之一。在冻存液中添加葡萄糖,可以帮助细胞在冷冻过程中维持一定的代谢活性,为细胞在复苏后快速恢复活力提供能量支持。
 
  4. 非渗透性保护剂
  一些冻存液中还会添加非渗透性保护剂,如蔗糖、甘油等。这些成分不能穿透细胞膜,但可以在细胞外形成高渗环境,促使细胞内的水分向外渗透,从而减少细胞内的冰晶形成。例如,一种不含 DMSO 的冻存液配方中包含蔗糖、甘油和异亮氨酸,这种组合在某些研究中显示出与传统含 DMSO 的冻存液相当的效果。
 
  5. 其他添加剂
  一些特殊的冻存液配方中还会加入其他成分以增强保护效果。例如,淀粉(HES)被证明在胚胎干细胞的冻存中可以作为有效的添加剂,有助于提高细胞的存活率。此外,某些研究还尝试添加 caspase 抑制剂(如 zVAD-fmk)来减少细胞在冷冻和解冻过程中因凋亡而受到的损伤。
 
  这些关键成分通过协同作用,为干细胞在低温环境中的保存提供了全面的保护。它们不仅能够减少冰晶对细胞的物理损伤,还能维持细胞的代谢平衡和膜完整性,从而确保干细胞在长时间低温保存后仍能保持其活性和功能。

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